Neie Coronavirus (SARS-Cov-2) Nukleinsäure Detektioun Kit
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(FluÄerzscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】Neie Coronavirus (SARS-Cov-2) Nukleinsäure Detektioun Kit (Fluorescent RT-PCR Sonde Method)
【Packaging specifications 】25 Tester / Kit
【Intended usAlter】
Dëse Kit gëtt fir d'qualitativ Erkennung vun Nukleinsäure vum neie Coronavirus an Nasopharyngeal-Wäschen, Oropharyngeal (Hals)-Swbs, anterior Nasal-Swbs, Mid-Turbinate-Swbs, Nasalwäschen an Nasalaspiraten vun Individuen, déi vun hirem Gesondheetsbetreiber verdächtegt sinn COVID19. D'Detektioun vun ORF1ab an N Genen vum neie Coronavirus ka fir Hëllefsdiagnos an epidemiologesch Iwwerwaachung vun der neier Coronavirus Infektioun benotzt ginn.
【Principles of the prozedure 】
Dëse Kit ass fir spezifesch TaqMan Sonden a spezifesche Primer entworf fir den neie Coronavirus (SARS-Cov-2) ORF1ab an N Gen Sequenzen. D'PCR-Reaktiounsléisung enthält 3 Sätze vu spezifesche Primer a fluoreszent Sonden fir spezifesch Detektioun vun Ziler, an en zousätzleche Set vu spezifesche Primer a fluoreszent Sonden gëtt als intern Standardkontroll vum Kit benotzt fir endogen Haushaltsgenen z'entdecken.
Den Testprinzip ass datt d'spezifesch fluoreszent Sonde duerch d'Exonuklease Aktivitéit vum Taq Enzym an der PCR Reaktioun verdaut an ofgebaut gëtt, sou datt d'Reporter fluoreszent Grupp an d'gequenched fluoreszent Grupp getrennt sinn, sou datt de Fluoreszenz Iwwerwaachungssystem e Fluoreszenz kritt. Signal, an dann Duerch d'Beräicherungseffekt vun der PCR-Verstäerkung erreecht de Fluoreszenz-Signal vun der Sonde e festgeluegte Schwellwäert-Ct-Wäert (Cycle-Schwell). Am Fall vu keen Zil Amplikon ass de Reportergrupp vun der Sonde no bei der Quenching Grupp. Zu dëser Zäit geschitt de Fluoreszenz-Resonanz-Energietransfer, an d'Fluoreszenz vun der Reportergrupp gëtt vun der Quenching-Grupp ofgeschwächt, sou datt de fluoreszent Signal net vum fluoreszent PCR-Instrument erkannt ka ginn.
Fir d'Benotzung vu Reagenzen während dem Test ze iwwerwaachen, ass de Kit mat positiven an negativen Kontrollen ausgestatt: déi positiv Kontroll enthält d'Zilplaz rekombinant Plasmid, an déi negativ Kontroll ass destilléiert Waasser, dat benotzt gëtt fir d'Ëmweltverschmotzung ze iwwerwaachen. Et ass recommandéiert eng positiv Kontroll an eng negativ Kontroll gläichzäiteg beim Testen ze setzen.
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Komponents | |
| Name | Spezifikatioun | Quantity | Quantity | |
| Positiv Kontroll | 180 μL/flasche | 1 | 1 | Kënschtlech konstruéiert Plasmiden, Destilléiert Waasser |
| Negativ Kontroll | 180 μL/flasche | 1 | 1 | Destilléiert Waasser |
| SARS-Cov-2 Mix | 358,5 μL/Fläsch | 1 | / | Spezifesch Primerpairen, spezifesch Detektiounsfluoreszentsonden, dNTPs, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Destilléiert Waasser, etc. |
| Enzym Mix | 16,5 μL/Fläsch | 1 | / | Taq Enzymen, ëmgedréint Transkriptase, UNG Enzymen, etc. |
| SARS-Cov-2 Mix (lyophiliséiert) | 25 Tester / Fläsch | / | 1 | Spezifesch Primerpairen, spezifesch Detektiounsfluoreszentsonden, dNTPs, Taq Enzymen, ëmgedréint Transkriptase, Destilléiert Waasser, asw. |
| 2 x Buffer | 375 μL/fläsch | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Destilléiert Waasser, etc. |
Note:(1) D'Komponente a verschiddene Batchkits kënnen net gemëscht oder austauscht ginn.
(2) Bereet Ären eegene Reagens: Nukleinsäure Extraktioun Kit.
【Storage condiions an expiration date 】
For BST-SARS-25:Transport a späichere bei -20 ± 5 ℃ fir eng laang Zäit.
For BST-SARS-DR-25:Transport bei Raumtemperatur. Store bei -20 ± 5 ℃ fir eng laang Zäit.
Vermeiden widderholl Afréiere-Thaw Zyklen. D'Validitéit Period ass tentativ fir 12 Méint festgeluecht.
Kuckt de Label fir den Datum vun der Fabrikatioun a Gebrauch.
No der éischter Ouverture kann de Reagens bei -20 ± 5 ° C fir net méi wéi 1 Mount gespäichert ginn oder bis zum Enn vun der Reagensperiod, egal wéi en Datum fir d'éischt kommt, fir widderholl Gefrier-Thaw-Zyklen ze vermeiden, an d'Zuel vun de Reagens-Gefriess. -Thaw Zyklen sollen net méi wéi 6 Mol sinn.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.Applicable Prouf Typ: Extrait Nukleinsäure Léisung.
2.Sample Lagerung an Transport: Store bei-20 ± 5 ℃ fir 6 months.Freeze an thaw d'Proben net méi wéi 6 Mol.
【Testing method】
1.Nucleic acid extraction
Wielt e passenden Nukleinsäure Extraktioun Kit fir viral Nukleinsäure ze extrahieren, a befollegt déi entspriechend Kitinstruktiounen. Et ass recommandéiert en Nukleinsäure Extraktiouns- a Reinigungskit ze benotzen deen vum Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd.
2. Reaction reagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Ewechzehuelen de SARS-Cov-2 Mix an Enzym Mix, komplett bei Raumtemperatur schmëlzen grëndlech duerch Vortex Apparat an dann centrifuge kuerz.
(2) 16.5uL Enzymmix gouf zu 358.5uL SARS-Cov-2 Mix bäigefüügt a grëndlech gemëscht fir déi gemëschte Reaktiounsléisung ze kréien.
(3) Bereet e proppert 0,2 mL PCR Octal Röhre a markéiert et mat 15uL vun der uewe gemëschter Reaktiounsléisung pro Well.
(4) Füügt 15 μL gereinegt Nukleinsäureléisung, déi positiv Kontroll an déi negativ Kontroll, a suergfälteg d'Oktale Röhrekappe bedeckt.
(5) Mëschung gutt andeems Dir op d'Kopp ëmgedréint ass, a séier centrifugéiert fir d'Flëssegkeet um Enn vum Röhre ze konzentréieren.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
( 1) Füügt 375ul 2x Buffer op d'SARS-Cov-2 Mëschung ((Lyophiliséiert) fir d'Reaktiounsmëschung ze preparéieren. Mix grëndlech duerch Pipettéierung an centrifugéiert duerno kuerz. laangfristeg Lagerung.)
(2) Bereet e proppert 0,2 mL PCR Oktalröhre a markéiert et mat 15μL Reaktiounsmëschung pro Well.
(3) Füügt 15μL vun gereinegter Nukleinsäureléisung, déi positiv Kontroll an déi negativ Kontroll derbäi, a suergfälteg d'Octal Röhrekappe bedeckt.
(4) Mix gutt andeems Dir op d'Kopp ëmgedréit, a séier centrifugéiert fir d'Flëssegkeet um Enn vum Röhre ze konzentréieren.
3. PCR ampliifcation (Kuckt w.e.g. d'Instrumenthandbuch fir Operatiounsastellungen.)
3. 1 Setzt d'PCR 8-Tube an d'Probekammer vum fluoreszent PCR-Instrument, a setzt d'Probe fir ze testen, d'positiv Kontroll an d'negativ Kontroll no der Uerdnung vum Luede.
3.2 Fluoreszenz Detektiounskanal:
(1) ORF1ab Gen wielt den Detektiounskanal vu FAM (Reporter: FAM, Quencher: Keen).
(2) N Gen wählt den Detektiounskanal vum VIC (Reporter: VIC, Quencher: Keen).
(3) Intern Standard Gen wählt den Detektiounskanal vum CY5 (Reporter: CY5, Quencher: Keen).
(4) Déi Passiv Referenz ass op ROX gesat.
3.3 PCR Programm Parameter Astellung:
| Schrëtt | Temperatur (℃) | Zäit | Zuel vun Zyklen | |
| 1 | Reverse Transkriptiounsreaktioun | 50 | 15 min | 1 |
| 2 | Taq Enzym Aktivatioun | 95 | 2,5 min | 1 |
| 3 | Taq Enzym Aktivatioun | 93 | 10 s | 43 |
| Annealing Extensioun a Fluoreszenz Acquisitioun | 55 | 30 s | ||
Nom Astellung, späichert d'Datei a lafen de Reaktiounsprogramm aus.
4.Results analysis
Nodeems de Programm eriwwer ass, ginn d'Resultater automatesch gespäichert, an d'Verstäerkungskurve gëtt analyséiert. D'Verstäerkungskurve ass op d'Standardschwell vum Instrument gesat.
【Explanation of test results 】
1. Bestëmmt d'Validitéit vum Experiment: De positiven Kontroll FAM, VIC Kanal soll eng typesch Amplifikatiounskurve hunn, an de Ct-Wäert ass allgemeng manner wéi 34, awer ka fluktuéieren wéinst verschiddene Schwell-Astellunge vu verschiddenen Instrumenter. Déi negativ Kontroll FAM, VIC Kanal soll net-verstäerkt Ct ginn. Et ass eens datt déi uewe genannten Ufuerderunge gläichzäiteg erfëllt musse ginn, soss ass dësen Test ongëlteg.
2. Resultat Uerteel
| FAM / VIC Kanal | Uerteel Resultat |
| Ct ＜37 | Prouf Test ass positiv |
| 37≤Ct-40 | D'Verstäerkungskurve ass S-förmlech, a verdächteg Proben mussen nei iwwerpréift ginn; wann d'Resultater vun der Neiprüfung konsequent sinn, gëtt se als positiv beurteelt, soss ass se negativ |
| Ct≥40 Oder Keng Amplifikatioun | Prouf Test ass negativ (oder ënner der ënneschter Limit vun Kit Detektioun) |
Notiz: (1) Wann souwuel de FAM-Kanal wéi och de VIC-Kanal gläichzäiteg positiv sinn, gëtt de SARS-Cov-2 als positiv bestëmmt.
(2) Wann de FAM-Kanal oder de VIC-Kanal positiv ass an den anere Kanal negativ ass, sollt den Test widderholl ginn. Wann et zur selwechter Zäit positiv ass, gëtt et als SARS-Cov-2 positiv beurteelt, soss gëtt et als SARS-Cov-2 negativ beurteelt.
Zesummenhang Produiten
-
COVID-19 IgM / IgG Antibody Detection Kit
COVID-19 IgM/IgG Antibody Detection Kit (Colloidal Gold Immunochromatography Method) Product Manual 【PRODUCT NAME】 COVID- 19 IgM/IgG Antibody Detection Kit （Colloidal Gold Immunochromatography Method) 【PACKAGING SPECIFICATIONS】Kit/Tests/Kit/1,1 ABSTRACT】 Déi nei Coronavirussen gehéieren zu der β Gattung. COVID-19 ass eng akut respiratoresch infektiiv Krankheet. Leit sinn allgemeng ufälleg. De Moment sinn d'Patienten infizéiert mam Roman Coronavirus d'Haaptquell ...
-
Nukleinsäure Extraktioun Oder Purification Kit
Nukleinsäure Extraktioun Oder Purification Kit oder bei -20 ℃ gespäichert. D'Probe soll mat 0 ℃ Curling transportéiert ginn. Aféierung D'Nukleinsäure Extraktioun Oder Purification Kit (Magnetic Beads Method) ass fir d'automatesch Reinigung vun RNA an DNA aus Kierperflëssegkeeten (wéi Swabs, Plasma, Serum) entwéckelt mat automateschen Nukleinsäure Extraktiounsinstrumenter. Magnéitesch Partikel Technologie liwwert héichqualitativ DNA / RNA déi gëeegent ass fir ...
-
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatogr...
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatography Method) Produkthandbuch 【PRODUCT NAME】 SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （Immunochromatography Method) 【PACKAGING SPECIFICATIONS】 1 Test/Kit 【ABSTRACTes】 gehéieren zu den neie Coronavirus Genus. COVID-19 ass eng akut respiratoresch infektiiv Krankheet. Leit sinn allgemeng ufälleg. De Moment sinn d'Patienten infizéiert mam neie Coronavirus den Haapt ...
-
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatography Method) Produkthandbuch 【PRODUCT NAME】 SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （Immunochromatography Method) 【PACKAGING SPECIFICATIONS】 1 Test/Kit ,25Tests/Kit STRA nei Coronavirussen gehéieren zu der β Gattung. COVID-19 ass eng akut respiratoresch infektiiv Krankheet. Leit sinn allgemeng ufälleg. De Moment sinn d'Patienten infizéiert vum neie Coronavirus d'Haaptquell vun der Infektioun; asymptomatesch infizéiert Leit ...